¶ 病毒研究
¶ 案例1-肝炎病毒感染肝球状体
CERO 3D细胞培养与生物反应器能够在无坏死和凋亡的情况下促进类球体的生长和成熟，而其他技术常常在此方面表现不足。因此，CERO 3D能够保持Huh7肝细胞系的先进3D培养状态。一次性使用的CERO管配备了Hepa过滤器，确保在进行病毒实验时的安全性。
实验描述
通过CERO 3D系统培养的肝细胞系类球体在暴露于HCV病毒之前已成熟培养20天。在暴露后的24、48和72小时内，通过棕色染色法对感染扩散速率进行监控和评估。
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成熟的类球体被感染了1000个传染性单位的丙型肝炎病毒（HCV）。感染程度随着时间的推移通过以下方法进行跟踪：
- 染色（棕色区域）：用于观察和识别感染区域。
- NSSA表达：通过检测NSSA（丙型肝炎病毒非结构蛋白5A）的表达水平来评估感染程度。
这种方法有助于详细追踪HCV感染在类球体中的扩散和进展情况，有利于深入理解病毒感染在3D肝细胞培养中的动力学。
在CERO中培养肝细胞类球体相比单层培养显著提高了细胞的扩展、分化、成熟以及肝脏病毒感染的效果。我们的研究受益于CERO中长期培养的健康细胞，这种培养方式保证了细胞的活力和功能性。此外，我们现在能够在CERO中进行人体组织标本的3D长期培养，这标志着研究方法的范式转变。
通过CERO的培养系统，我们能够维持长期的健康细胞状态，突破了传统单层培养的限制，尤其是在病毒感染和组织工程研究中的应用潜力大幅提高。
¶ HPV病毒感染宫颈类器官
¶ 引言
人乳头瘤病毒（HPV）感染是导致多种妇科疾病，特别是宫颈癌的主要原因。深入研究HPV在妇科疾病中的致病机制，对预防和治疗具有重要意义。德国OMNI Life Science公司的CERO 3D Cell Culture and Incubator是一款先进的三维细胞培养及孵育仪器，能够提供高度可控和模拟体内环境的培养条件，适用于构建复杂的体外模型，如宫颈类器官。这些高级模型在HPV相关妇科疾病研究中具有显著优势。
Fallopian tube 输卵管 Ovary 卵巢 Uterine corpus 子宫体 Uterine cervix 子宫颈 Endometrium子宫内膜 Endocervix 子宫颈内口 Ectocervix子宫颈外口 |
Vagina 阴道 Epithelial cells 上皮细胞 Collagen 胶原蛋白 Irradiated feeder cells 辐射处理的饲养细胞 3D culture 三维培养 Differentiation and expansion 分化与扩增 Ectocervical Organoid 子宫颈外口类器官 Ki67⁺ （增殖标志） p63⁺ （分化标志） |
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1. 宫颈外口处的上皮细胞 宫颈外口上皮主要由鳞状上皮构成。它是由单层或者多层的扁平细胞构成，具有保护功能，能够防止外界病原体入侵。 ¶ 1.1 鳞状上皮
¶ 1.2 柱状上皮在某些区域，鳞状上皮的外层细胞呈现柱状形态，特别是在子宫颈外口附近的某些部位。此类上皮细胞负责分泌并提供黏液，帮助保护子宫颈不受外界细菌的侵袭。 ¶ 2. 宫颈内口的上皮细胞宫颈内口上皮的结构与外部上皮明显不同，主要由单层柱状上皮构成，形成了一层相对较薄的保护屏障，通常被称为“宫颈内口上皮”。 ¶ 2.1 柱状上皮
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¶ 构建
| 2024年发布的《子宫颈癌类器官规范化建立及临床转化应用探索专家共识》 |
类器官的规范化建立：
eg:CERO 3D细胞培养与基质胶3D培养的比较(基质胶3D细胞培养存在的问题)
临床转化应用探索：
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¶ 子宫颈类器官的构建方法
| 子宫颈类器官（Cervical Organoids）是一种三维（3D）体外培养的微型组织结构，能够模拟子宫颈的微环境和生理功能。类器官技术为研究子宫颈的发育、生理功能、疾病机制（如宫颈癌、宫颈炎症）以及药物筛选提供了强有力的工具。通过构建子宫颈类器官，研究人员可以在体外环境中重现子宫颈的复杂结构和功能，从而更深入地理解其生物学特性。 | |
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构建子宫颈类器官的第一步是选择合适的细胞来源。常用的细胞来源包括：
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¶ 干细胞分化与诱导 根据所选细胞来源，采用特定的诱导策略将干细胞分化为子宫颈上皮细胞。这通常包括以下步骤： ¶ 1 胚层诱导首先，诱导多能干细胞向胚胎外胚层、内胚层或中胚层分化，具体取决于子宫颈上皮细胞的起源。子宫颈上皮主要来源于中胚层和外胚层的特定分化途径。 ¶ 2 定向分化使用特定的生长因子和小分子化合物，定向诱导细胞向子宫颈上皮细胞分化。例如：
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¶ 原代子宫颈上皮细胞
¶ 1. 细胞来源 原代子宫颈上皮细胞主要来源于以下几种途径：
¶ 2. 细胞分离与纯化¶ （1）单细胞悬液制备将采集到的子宫颈组织进行机械剪碎后，采用TIGR细胞悬液制备分离细胞。 ¶ 3. 细胞纯化（1）磁珠法分选：使用针对上皮细胞特异性标志物（如E-cadherin）的抗体，结合磁珠进行细胞分选。 （2）流式细胞仪分选 ¶ 4. 3D细胞培养在传统的二维培养基础上，三维细胞培养技术能够更好地模拟体内细胞的微环境，促进细胞的自然分化和功能表达。CERO 3D细胞培养系统是一种先进的三维培养平台，原代子宫颈上皮细胞能够在更接近体内的三维环境中生长，形成更具生理相关性的类器官结构。这不仅提升了类器官的稳定性和功能性，还为复杂生物过程的研究提供了更可靠的模型。 |
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¶ 子宫颈类器官在医学研究中的应用子宫颈类器官在多个领域中展现出了巨大的应用潜力，尤其是在以下几个方面： 疾病模型： 子宫颈类器官可以用于模拟子宫颈的各种疾病，尤其是宫颈癌。通过在类器官中加入特定的癌症相关基因突变，可以构建宫颈癌的体外模型，研究癌细胞的生长、转移以及药物反应。
感染研究： 子宫颈是多种性传播疾病的入口。通过使用类器官，研究人员可以更好地理解如人乳头瘤病毒（HPV）等病毒如何感染宫颈细胞，以及这些感染如何影响子宫颈的功能。 药物筛选与毒性评估： 子宫颈类器官可以用于筛选新药物和测试现有药物对宫颈组织的毒性。由于其能够维持子宫颈上皮细胞的生理状态，它们为药物的筛选提供了更为准确的体外平台。 再生医学： 在未来的研究中，子宫颈类器官也可能用于再生医学，尤其是用于修复受损的宫颈组织或治疗宫颈相关的疾病（如宫颈衰弱等）。 |
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材料来源：
研究方向：
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共培养系统（Co-culture system）：
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