CelVivo ClinoStar Demo 实战手册 — Demo 前沟通版
版本: V1 合并版 (Checklist + 客户现场准备)
整理日期: 2026-09-01
整合自:
- CelVivo KB 13 份 Protocol 实战数据 (001/003/004/005/006/007/008/009/010/011/012/013/022)
- 前列腺癌 14 篇文献 KB (PMC12730618 / PMC12831780 / PMC12803348 等)
celvivo-demo-optimization skill 实战铁律
适用场景: 客户来 我 实验室做 CelVivo ClinoStar Demo 前沟通文档 (可直接发给客户)
🎯 文档目标
本手册是一份 Demo 前沟通文档, 核心目的:
- 客户来之前, 提前知道 我 这边需要什么、我 实验室能做什么
- 客户来当天, 9 件套必带 + 5 项必填信息 + 7 件必签文档 + 我 必查 4 件套
- Demo 期间, 4 大客户类型差异化 SOP + 救球 3 件套 + 7 天 / 14 天 / 28 天完整时间表
📚 CelVivo KB 13 份 Protocol 实战一览 (必读标星)
| 编号 |
Protocol |
实战价值 |
Demo 必读 |
| 001 |
Cultivating 总纲 |
Self-assembly / 低粘附微孔板 / 水凝胶 三路径 |
⭐⭐⭐ |
| 003 |
ClinoReactor 准备 |
标准流程 |
⭐⭐ |
| 004 |
换液 |
48h / 48h / 72h / 48h 周期 |
⭐⭐⭐ |
| 006 |
Gardening 均化 |
P200 tip 移除不规则聚球 |
⭐⭐⭐⭐⭐ 救球 |
| 007 |
球体转移 |
4-5 mL 装载 |
⭐⭐⭐ |
| 008 |
单细胞自组装 |
5-6 mL + 1-2 × 10⁶ + 3-6 RPM |
⭐⭐⭐⭐⭐ |
| 009 |
低粘附微孔板预聚球 |
Kugelmeiers Spherical 5D + 1000 cells/well + 100 × g 3 min + 过夜 + 2-3 mL 转入 + 6-9 RPM |
⭐⭐⭐⭐⭐ 想均一必走 |
| 010 |
Ultra Low Adherent ClinoReactor |
Biofloat Clean Coating |
⭐⭐ |
| 011 |
共培养 |
HepG2/LX-2 90/10 = 1.125 × 10⁶ total |
⭐⭐ |
| 012 |
转速调整 |
Day 0 = 3-6 RPM, Table 1 每日递增, Day 9 单细胞 13-20 RPM, Day 5 低粘附微孔板 10-16 RPM |
⭐⭐⭐⭐⭐ |
| 013 |
70/100 μm 过滤 |
PluriSelect 100/400 μm 双层, back flush 2-4 mL |
⭐⭐⭐⭐⭐ 救球 |
| 022 |
甲基纤维素增粘 |
8% 母液 + 0.5-1% 工作液 + 起始 3 RPM 每日 +1 |
⭐⭐⭐⭐⭐ |
🅥 第一部分: Demo 类型速查 (我 实战分类)
| Demo 类型 |
时长 |
关键路径 |
必读 Protocol |
| A. 标准 7 天 Demo |
Day -1 → Day 7 |
低粘附微孔板 (009) + ClinoReactor |
009 + 012 + 006 + 004 |
| B. 短期 3 天 Demo |
Day 0 → Day 3 |
单细胞自组装 (008) |
008 + 012 + 006 |
| C. 长期 14-28 天 Demo |
Day -1 → Day 28 |
低粘附微孔板 + 长期培养 + 传代 |
009 + 007 + 005 + 012 |
| D. 客户原代细胞 Demo |
Day -3 → Day 14 |
低粘附微孔板预筛 + 多条件 |
009 + 022 + 012 + 010 |
| E. 共培养 Demo |
Day -1 → Day 14 |
共培养接种 |
011 + 009 + 012 |
🅥 第二部分: 客户必填信息 (Demo 前 1 周邮件微信必填)
| # |
信息项 |
用途 |
KB Protocol 来源 |
| 1 |
细胞类型 + 物种 (人源 / 鼠源) |
决定培养基 + 起始 RPM |
008 §Reagents |
| 2 |
培养基配方 (客户 2D 用的培养基品牌 + 添加剂) |
至少前 3 天不换 |
008 §Additional |
| 3 |
2D 传代比例 + P 代次 (P 越年轻越好, <15 优先) |
决定 3D 接种密度 |
002 §1 |
| 4 |
研究目的 (药筛 / 类器官 / DILI / 毒性 / 共培养) |
决定终点指标 + Protocol 路径 (008/009/014/011) |
001 §2 |
| 5 |
预期时长 (3 天 / 7 天 / 14 天 / 28 天) |
决定 demo 是哪条 SOP |
001 §10 |
| 6 |
客户 2D 痛点 (现有什么问题) |
后续对比话术 + 我 价值点 |
Skill §1.1 |
| 7 |
NDA 状态 (是否已签) |
决定技术细节开放程度 |
我 销售流程 |
| 8 |
细胞到达日期 + 运输方式 (干冰 / 常温) |
决定接样安排 |
002 §1 |
| 9 |
客户对照片 / 录像许可 |
决定 demo 数据能否入 我 PPT |
Skill §1.1 |
客户 Demo 准备表 (微信发给客户)
📱 客户 Demo 准备表 (9 项必填)
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
1️⃣ 细胞类型 + 物种:____________
2️⃣ 培养基品牌 + 添加剂:____________
3️⃣ 2D 传代比例 (1:N) + 当前 P 代次:____________
4️⃣ 研究目的:____________
5️⃣ 预期 demo 时长:____________
6️⃣ 2D 痛点:____________
7️⃣ NDA 状态:____________
8️⃣ 细胞到达日期 + 运输:____________
9️⃣ 拍照录像许可:____________
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
⚠️ 客户细胞活力 (Trypan Blue) 必须 >90%
⚠️ 客户细胞汇合度必须 70-80%
⚠️ 客户细胞运输必须保留冰袋 + 温度记录
🅥 第三部分: 客户必带物品 (Demo 当天带到 我 实验室)
| # |
物品 |
规格 / 数量 |
KB Protocol 来源 |
客户可提供 / 我 备 |
| 1 |
细胞 (P<15 代) |
70-80% 汇合度, 1 × T25 / T75 flask |
002 §1 |
客户必带 |
| 2 |
客户原培养基 + 添加剂 (够 3 天用) |
50 mL × 2 |
008 §Reagents |
客户必带 |
| 3 |
客户 TrypLE / Trypsin (客户的消化酶) |
5 mL × 1 |
008 §Step 1 |
客户必带 (避免客户适应问题) |
| 4 |
客户 PBS + DMSO |
各 50 mL |
008 §Reagents |
客户必带 |
| 5 |
客户细胞冻存液 + 冻存管 |
1 mL × 5 |
002 §1 |
客户必带 (备份) |
| 6 |
客户细胞背景资料 (passage 记录 + STR 验证) |
1 份 PDF |
002 §1 |
客户必带 |
| 7 |
客户培养基检测报告 (我方助 pH / osm / 葡萄糖检测) |
1 份 |
我 备 |
我 备 |
| 8 |
生物安全柜 + 二氧化碳培养箱 + 离心机 + 显微镜 |
— |
008 §Equipment |
我 备 (已就位) |
| 9 |
ClinoStar + ClinoReactor + 低粘附微孔板 (Kugelmeiers) |
— |
008/009 |
我 备 (已就位) |
我 备的"应急小瓶" (Skill §1.3 实战铁律)
我 这边永远备:
✅ 3 个预培养的 HepG2 球体 (Day 7 标准对照) — 客户细胞失败时救场用
✅ 2 个 MCF-7 球体 (Day 14) — 同上
✅ 1 张 Live/Dead 染色图 (绿色活细胞为主) — 客户看到数据立即信任
✅ 1 张 2D vs 3D CYP3A4 5-7× 对比图 — 客户做毒筛必看
🅥 第四部分: 我 必查"4 件套" (Demo Day 0 必跑检查)
□ 1. 客户细胞活力 (Trypan Blue) → 必须 >90% (008 §Reagents)
□ 2. 客户细胞汇合度 → 必须 70-80% (002 §1)
□ 3. 客户培养基颜色 + 透明度 → 必须无浑浊 (002 §1)
□ 4. 客户细胞形态 (显微镜下) → 必须形态正常 (002 §1)
⚠️ 任一不过 → Demo 推迟 24-48h, 重新培养。强行 demo = 必然失败 + 客户失去信心。
🅥 第五部分: 客户现场必做 (Demo Day 0 现场操作)
| # |
步骤 |
时长 |
KB Protocol 来源 |
谁做 |
| 1 |
客户介绍 + 实验室参观 (30 min) |
30 min |
Skill §2.1 |
我 引导 + 客户自我介绍 |
| 2 |
客户细胞接样 + 显微镜下检查形态 |
15 min |
002 §1 |
我 接样 + 客户确认 |
| 3 |
客户细胞 70-80% 汇合度验证 (拍照) |
5 min |
002 §1 |
我 拍照记录 |
| 4 |
客户 TrypLE 消化 (客户的酶 + 客户的温度 + 客户的时间) |
20 min |
008 §Step 1 |
我 指导 + 客户操作 |
| 5 |
客户细胞计数 + 活力检测 (Trypan Blue + 自动计数仪) |
15 min |
008 §Step 2 |
我 监督 + 客户实操 |
| 6 |
70 μm 过滤单细胞 (你 24h 救法必备) |
10 min |
013 |
我 操作 |
| 7 |
单细胞悬液稀释到 1 × 10⁶ total / 5 mL 装载 |
10 min |
008 §Step 5 |
我 + 客户计算确认 |
| 8 |
装 ClinoReactor (008 路径 5 mL / 009 路径 2-3 mL) |
15 min |
008 §Step 4-14 / 009 §Fill ClinoReactor |
我 操作 + 客户观察 |
| 9 |
ClinoStar 设置 + 起始 RPM 3-6 |
5 min |
012 |
我 操作 + 客户记录 |
| 10 |
客户午餐 + 设备现场答疑 |
30 min |
Skill §2.1 |
我 答客户 |
🅥 第六部分: 客户必问 8 个问题 (我 实战必问清单)
| # |
问题 |
用途 |
| 1 |
"您客户的细胞在 2D 培养多久了?现在 P 几代?" |
决定 demo 时长 + Protocol 路径 |
| 2 |
"您之前做过 3D 培养么?用什么方法 (悬滴 / 低粘附板 / Matrigel)?" |
决定客户预期管理 + 难度评估 |
| 3 |
"您期望 3D 球体大小是均匀还是不均匀?" |
走 008 还是 009 |
| 4 |
"您客户的研究目的是药筛、类器官建模还是 DILI 毒性?" |
决定加药时间 + 终点指标 |
| 5 |
"您客户的细胞是原代细胞还是细胞系?" |
决定风险等级 + 备援细胞 |
| 6 |
"您想看球体的形态学 (明场) 还是功能学 (Live-Dead / ATP)?" |
决定是否需要染色 + 染色时机 |
| 7 |
"您期望 demo 出数据是 Day 7 还是 Day 14 还是 Day 28?" |
决定 demo 路径 + 客户汇报时间 |
| 8 |
"您需要 demo 期间实时照片 / 视频给老板汇报么?" |
决定 我 客户日报格式 |
🅥 第七部分: 客户必讲 5 大卖点 (我 实战话术)
1. ClinoStar 设备原理 + 微重力 (gravity vector < 1g)
2. 3 大路径可选:008 自组装 / 009 低粘附微孔板 / 014 海藻酸钠包埋
3. 客户原代细胞可保留 TME + 异质性 (优于细胞系)
4. 18 天恢复 in vivo 功能 (HepG2/C3A 实战数据, 001 §11)
5. 救球 3 件套:006 + 013 + 022 (我 实战总结)
🅥 第八部分: 客户必签 7 件文档 (Demo 当天)
| 文档 |
用途 |
谁签 |
| 设备使用确认书 |
客户确认 CelVivo 设备使用合规 |
客户 + 我 |
| 细胞样品处理同意书 |
客户细胞 我 仅用于 demo, 不做他用 |
客户 + 我 |
| NDA 双向保密协议 |
(如未签) 双方技术细节保密 |
客户法人 + 我 法人 |
| 数据归属确认书 |
Demo 数据归客户, 我 仅做演示 |
客户 + 我 |
| Demo 报价单 |
Demo 服务费 + 后续设备报价 |
客户 + 我 |
| 客户回访问卷 |
客户对 我 demo 的反馈 |
客户 (匿名) |
| 客户案例授权书 |
我 是否能用客户 demo 案例做后续宣传 |
客户 (可选签) |
🗓️ 第九部分: A. 标准 7 天 Demo 时间表 (我 实战推荐)
📅 Day -7 (Demo 前 1 周) — 接样准备
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键检查点 |
| 09:00 |
客户信息收集表 (5 项必填) |
Skill §1.1 |
细胞类型/培养基/P 代次/2D 痛点/客户预期 |
| 09:30 |
预订试剂: Kugelmeiers Spherical 5D 96 孔板 (009 必备) |
009 Reagents |
货号、ETA |
| 10:00 |
预订 PluriSelect 100 + 400 μm 细胞筛网 (013 救球) |
013 Reagents |
货号 43-50100-51 |
| 10:30 |
预订 甲基纤维素 (Sigma M7027, 15 cP) (022 备) |
022 Reagents |
货号 |
| 11:00 |
客户 2D 培养 (我 这边代培养 3-5 天) |
002 |
70-80% 汇合度 |
📅 Day -1 (Demo 前 1 天) — ClinoReactor + 低粘附微孔板准备
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键数字 |
| 09:00 |
ClinoReactor 准备 (5-6 mL 装载) |
003 + 010 |
Biofloat 涂膜 + 25 mL 无菌水 hydrate beads + 4h 等 |
| 13:00 |
低粘附微孔板预聚球 (009 路径) |
009 |
1000 cells/well + 100 × g 离心 3 min + 37°C 过夜 |
| 14:00 |
0.5% 甲基纤维素母液备 (022 防聚团) |
022 |
8% 母液 → 0.5% 工作液 (12 mL 培养基 + 750 μL 母液) |
| 15:00 |
客户日报格式准备 (我 邮件/微信) |
Skill §3.2 |
含图 + size 测量 |
📅 Day 0 (Demo 当天) — 客户到场 + 装载
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键操作 |
| 09:00 |
客户到达 + 设备原理讲解 |
Skill §2.1 |
30 min 介绍 |
| 09:30 |
客户细胞处理 |
008 Step 1-2 |
TrypLE 单细胞悬液 + 计数 + 活力检测 |
| 10:30 |
70 μm 过滤单细胞 (013 防聚团) |
013 |
PluriSelect 100 μm 必过 |
| 11:00 |
装 ClinoReactor (5-6 mL, 1-2 × 10⁶ total) |
008 Step 4-5 |
我 上次用 13 × 10⁶ 是 13 倍过高! |
| 11:30 |
ClinoReactor 装载 (从低粘附微孔板转入 009 路径) |
009 Step 8-15 |
2-3 mL 装载 |
| 12:00 |
ClinoStar 设置 |
012 |
起始 RPM:3-6 (我 上次 8 偏高) |
| 12:30 |
客户午餐 + 设备现场答疑 |
Skill §2.1 |
— |
📅 Day 1-2 — 早期观察 + 首换液
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键 |
| 08:30 |
明场观察 + 拍照 |
Skill §3.1 |
size 分布记录 |
| 09:00 |
判别是否首见聚球 (500 cells) |
012 |
Day 1-4 出现 |
| 09:30 |
Day 2 首次换液 (48h) |
008 Step 17 + 004 |
5-6 mL 吸出 → 5-6 mL 新鲜 |
| 10:00 |
RPM 调整 |
012 |
Day 2 = 5-10 RPM |
⚠️ Day 1-2 必查项目 (大聚球救火窗口)
🔍 显微镜下判别:
□ 大聚球 (>200 μm)? → 立刻走 Protocol 006 Gardening + 013 过滤
□ 单细胞残留多? → 加 0.5% 甲基纤维素 (022)
□ 气泡? → 轻拍 + 倾斜
□ 污染? → 立即丢弃 + 拍照记录
📅 Day 3-5 — 球体成熟期 + 救球窗口
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键 |
| 08:30 |
明场观察 + 拍照 |
012 Figure 1 |
看 size 分布 |
| 09:00 |
Day 3: Gardening (006) |
006 |
P200 tip 移除不规则聚球 |
| 09:30 |
Day 5: 低粘附微孔板路径到达"Optimal" |
012 Figure 1 |
"After day 5 with microwell plate aggregation" |
| 10:00 |
RPM 调整 (Table 1) |
012 |
Day 3 = 7-13, Day 5 = 10-16 |
📅 Day 6-7 — 加药窗口 + 客户首汇报
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键 |
| 08:30 |
观察 + 拍照 |
012 |
球体大小稳定 |
| 09:00 |
Day 6: 加药 / Live-Dead 染色 |
PMC12730618 |
Calcein AM + BOBO-3 |
| 10:00 |
Day 7: 客户首汇报 + 拍照 PPT |
Skill §3.2 |
我 客户汇报 PPT |
| 14:00 |
客户现场答疑 + 数据讨论 |
Skill §1.1 |
— |
📅 Day 8-14 — 球体成熟 + 长期数据
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键 |
| Day 8-10 |
首换 ClinoReactor (007 Transferring) |
007 |
新 ClinoReactor + 4-5 mL 装载 |
| Day 10 |
首分裂 (005 Splitting) |
005 |
4 mL 新装载 + 拆分多瓶 |
| Day 14 |
球体成熟 (成熟 = "Round spheroids") |
008 Step 19 |
3 周 (~21 天) 成熟 |
📅 Day 15-28 — 长期培养 + 收数据
| 时间 |
任务 |
Protocol |
关键 |
| Day 15-21 |
球体成熟期 |
008 Step 19 |
"similar-sized, round spheroids" |
| Day 18 |
HepG2/C3A 18 天恢复 in vivo 功能 |
007 |
客户报告可引用 |
| Day 21 |
球体成熟 |
008 |
size 稳定 + 形态圆 |
| Day 28 |
完整 demo 数据整理 + 客户 PPT |
Skill §3.2 |
— |
🚨 第十部分: 4 种客户类型差异化 Checklist (我 实战分类)
🅥 类型 1: 药企 (大客户, 4 周 demo)
□ 客户 KAM 关系建立
□ NDA + 试剂详情沟通
□ Day -3: 客户原代细胞预筛 (3 浓度 × 3 培养基)
□ Day -1: 低粘附微孔板预聚球 (009 + 022 防聚团)
□ Day 0: ClinoReactor 装载 (1-2 × 10⁶ + 5-6 mL)
□ Day 1-14: 每日观察 + RPM 调整 (Table 1)
□ Day 7: 中期报告 (PPT + 拍照)
□ Day 10: Splitting (005)
□ Day 14: 长期培养 + 收数据
□ Day 21: 球体成熟
□ Day 28: 完整 demo PPT + 报价 (5 大参数 + ROI)
□ 后续: 跟进 + 续单
🅥 类型 2: 学术 PI (中客户, 2 周 demo)
□ 客户 PI 文献背景调研 (PMC + PubMed)
□ Day -1: 低粘附微孔板预聚球 (009)
□ Day 0: ClinoReactor 装载 (1 × 10⁶ + 5 mL)
□ Day 1-7: 每日观察
□ Day 7: 首汇报 (Live-D 染色 + size 数据)
□ Day 10: 球体成熟 + 客户讨论下游应用
□ Day 14: 完整报告 + 仪器报价 + 共一文章 offer
□ 后续: 售后技术支持
🅥 类型 3: Biotech / CRO (中客户, 1 周 demo)
□ 客户应用场景明确 (药筛 / DILI / 类器官)
□ Day 0: 直接 ClinoReactor 自组装 (008)
□ Day 1-3: 早期观察 (决定 demo 命运)
□ Day 5: 中期数据
□ Day 7: 最终 PPT (size + Live-D + 客户应用建议)
□ 后续: 平台报价 + 培训
🅥 类型 4: CDMO 工业客户 (战略大客户, 4 周 demo + 多项目)
□ 客户管线分析 + 多细胞类型 demo 计划
□ Day -7: 多细胞类型 + 多 ClinoReactor 准备
□ Day 0: 共培养 (011 HepG2/LX-2 90/10) + 客户细胞类型
□ Day 1-7: 每日观察 + 救球预案
□ Day 14: 中期报告 (多细胞对比 + 数据 PPT)
□ Day 28: 完整 demo + 平台报价 + 长期合作框架
□ 后续: 季度技术培训 + 应用支持
🚨 第十一部分: Demo 失败应急 SOP (我 实战高频)
案例 A: 客户细胞成球困难 (24h 无可见聚球)
诊断: TrypLE 消化过度 / 死细胞过多 / 起始密度过低
救法:
1. 检查单细胞悬液活力 (Trypan Blue) → 必须 >90%
2. 提升起始密度 (1 → 2 × 10⁶)
3. 加 0.5% 甲基纤维素 (022)
4. 跑对照:客户 2D 直接种 ClinoReactor (无 TrypLE)
案例 B: 大聚球 + 不均一 (你 24h 实战问题)
诊断: 起始密度过高 + RPM 偏高 + 跳低粘附微孔板
救法 (按优先级):
1. **立刻走 Protocol 006 Gardening** (P200 tip 移大球)
2. **加 0.5% 甲基纤维素** (022, 防继续聚团)
3. **70/100 μm 过滤** (013, 留下均一球)
4. **加新 ClinoReactor** (007, 重启)
案例 C: 客户细胞死亡 (污染 / 凋亡)
诊断: 镜下浑浊 / 颜色变化 / pH 异常
救法:
1. 立即拍照 + 记录
2. 备份样品 (留作分析)
3. 重新启动 demo (Day 0 重做)
4. 客户沟通: 备 3 个预培养 HepG2/MCF-7 应急球体 (Skill §1.3)
案例 D: 客户中途改条件
诊断: 客户临时改密度 / 培养基 / 加药时间
救法:
1. 暂停当前 demo
2. 用 Protocol 009 低粘附微孔板预筛新条件
3. 48h 内反馈客户预筛结果
4. 决定继续原 demo 或重启
📊 第十二部分: Demo 关键数字速查表 (我 实战话术)
🎯 自组装 (Protocol 008)
| 项 |
数字 |
| 装载体积 |
5-6 mL |
| 起始总数 |
1-2 × 10⁶ total |
| 起始 RPM |
3-6 |
| 首换液 |
48-72h |
| 首见聚球 |
1-4 days |
| 球体成熟 |
~3 weeks |
| HepG2/C3A 18 天 |
恢复 in vivo 功能 |
🎯 低粘附微孔板 (Protocol 009)
| 项 |
数字 |
| 低粘附微孔板 |
Kugelmeiers Spherical 5D / AggreWell 400 |
| 每孔密度 |
1000 cells/well |
| 离心 |
100 × g, 3 min |
| 培养 |
37°C 5% CO₂ 过夜 |
| 转入 ClinoReactor |
2-3 mL |
| 转入后 RPM |
6-9 |
🎯 转速 (Protocol 012 Table 1)
| Day |
Single cell RPM |
Microwell RPM |
| 0 |
3-6 |
— |
| 1 |
5-10 |
5-10 |
| 2 |
5-12 |
5-12 |
| 3 |
7-13 |
7-13 |
| 4 |
7-15 |
7-15 |
| 5 |
10-16 |
10-16 (optimal))** |
| 6 |
11-16 |
11-16 |
| 7 |
11-16 |
11-16 |
| 8 |
13-20 |
13-20 |
| 9 |
13-20 |
13-20 |
| 10 |
15-21 |
15-21 |
| 14 |
15-22 |
15-22 |
| 21 |
16-25 |
16-25 |
🎯 救球 (Protocol 006/013/022)
| 救球工具 |
何时用 |
关键数字 |
| 006 Gardening |
早期不均一 (Day 1-5) |
P200 tip 移大球 |
| 013 过滤 |
大聚球过多 (Day 1-7) |
100/400 μm PluriSelect |
| 022 甲基纤维素 |
防过度聚团 |
0.5-1% 工作液 + 8% 母液 |
| 007 Transferring |
Day 10 换 ClinoReactor |
4-5 mL 装载 |
| 005 Splitting |
Day 10 分裂 |
4 mL 装载 + 拆分多瓶 |
🎯 换液节奏 (Protocol 004)
HepG2/C3A 示范周期:48h / 48h / 72h / 48h / 48h / 72h
其他细胞:every 2 days 起步, 按客户细胞调
✅ 第十三部分: Demo 启动前最终 Checklist (我 5 件套)
□ 1. 客户信息 5 件套 (细胞类型 / 培养基 / P 代次 / 2D 痛点 / 客户预期)
□ 2. 试剂预订 3 件套 (Kugelmeiers 低粘附微孔板 + PluriSelect 筛网 + 甲基纤维素)
□ 3. ClinoReactor 准备 (Biofloat 涂膜 + 25 mL 无菌水 hydrate + 5-6 mL 装载 + 4h 平衡)
□ 4. 客户 2D 培养 (70-80% 汇合度)
□ 5. 应急球体备份 (HepG2 Day 7 + MCF-7 Day 14)
📌 第十四部分: 实战 10 大教训 (9-01 实战沉淀)
| # |
教训 |
铁律 |
| 1 |
密度过高是大聚球主因 |
单细胞总 = 1-2 × 10⁶, 不超 2.5 × 10⁶ |
| 2 |
RPM 偏高加剧不均一 |
Day 0 = 3-6 RPM, 绝不直接上 8+ |
| 3 |
跳低粘附微孔板 = 必然不均一 |
想要均一,必走 Protocol 009 低粘附微孔板预聚球 |
| 4 |
不换液 = 营养枯竭 |
48h 首换液 不能拖 |
| 5 |
首见聚球 1-4 天是正常的 |
9h 出大聚球 = 过早 + 密度过高 |
| 6 |
救球 3 件套:006 + 013 + 022 |
任何时候不均一,用这3 个 |
| 7 |
客户细胞死亡 = 立即备份 |
永远留 HepG2 应急球体 (Skill §1.3) |
| 8 |
客户中途改条件 |
暂停 + 009 预筛 + 48h 内回复 |
| 9 |
数据 PPT 必含 size 分布图 |
Day 7/14/21 客户 PPT 必备 |
| 10 |
客户 PI 文献背景必读 |
PMC + PubMed 5 篇再报价 |
💡 第十五部分: 我 实战话术 (给客户讲)
"CelVivo ClinoStar Demo 我有完整的 5 种客户类型 SOP + 7 天到 28 天完整日程 + 救球 3 件套 (006 Gardening + 013 过滤 + 022 甲基纤维素)。最关键的 4 个数字:1-2 × 10⁶ total cells / 5-6 mL 装载 / 3-6 RPM 起始 / 48h 首换液。想要均一球体必须走 Kugelmeiers Spherical 5D 低粘附微孔板预聚球。"
"客户来 Demo 现场必带 9 件套 + 必填 9 项信息 + 必签 7 件文档。我 这边必查 4 件套 (活力 >90% / 汇合度 70-80% / 培养基透明 / 形态正常),必带 应急小瓶 (HepG2 + MCF-7)。缺一不可,任一不过 → demo 推迟 24-48h。"
实战汇总: 本手册整合 CelVivo KB 13 份 Protocol 实战数据 + 前列腺癌 14 篇文献 KB + celvivo-demo-optimization skill 9-1 实战铁律。我 实战核心 = 密度不超 2.5 × 10⁶ / 起始 3-6 RPM / 跳低粘附微孔板必救 / 48h 首换液 / 救球 3 件套 006 + 013 + 022。🧠⚡