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LivingCell-Fluo Insight 类器官实时活力分析系统 — 官网全量中文介绍

LivingCell-Fluo Insight Organoid Real-Time Vitality Analysis System — Full Chinese Introduction from the Official Website

转发语:伯桢生物 2024 年 12 月发布的 LivingCell-Fluo Insight 是类器官专用的荧光代谢活力读板终端——不裂解、不做显微成像,96 孔整板 60 秒出数、精度 ≤0.4%、可分辨 2% 的活细胞数偏差,同一块板可隔天连读形成生长曲线与药敏曲线;官方数据实测精密度约为参比进口酶标仪的 3–7 倍,5-FU 药敏直接给出 IC50 = 0.8526 µM(结直肠癌)/ 1.190 µM(胰腺导管癌),并已用于 Life Medicine 2025 稀有病类器官自动化高通量筛选平台。

LivingCell-Fluo Insight 官方发布封面

图 1:LivingCell-Fluo Insight 官方发布稿封面图(伯桢生物 2024-12-28 官方专栏配图)。

项目 内容
产品名称 LivingCell-Fluo Insight 类器官实时活力分析系统
厂家 伯桢生物科技(苏州)有限公司 / bioGenous Technologies (Suzhou) Co., Ltd.
配套试剂盒 bioGenous LivingCell-Fluo™ Organoid Vitality Assay Kit(货号 E238004)
检测原理 Resazurin 代谢还原 → 红色强荧光(Ex 约 530 nm / Em 590 nm;说明书口径 Ex 560±10 nm / Em 590±10 nm)
是否裂解 否 —— 即用型,样本放入即读取,可反复读同一孔板
读板方式 底部读数,不开盖,排除顶部干扰与污染风险
检测精度 ≤ 0.4%
通量 96 孔整板 < 60 s;适配多品牌 96–384 孔板
出数速度 最快三步读数,全程 < 2 min
自动化 无菌测定后可继续培养扩增;预留机械臂接口
分析功能 活力 / 毒性 / 连续生长曲线 / 药敏曲线(IC50 拟合)/ 一键导出报告

📣 一、为什么需要一台"专用的活力检测终端"

类器官活力检测的经典路径有三条,各有硬伤:

方法 原理 硬伤
CCK-8 / MTT 代谢产物比色 受培养环境微小变化干扰;对三维结构灵敏度不足;操作繁琐;本身会扰动样本
ATP 检测试剂盒(E238003) 裂解释放 ATP → 荧光素酶发光 必须裂解,无法活体连续监测,样本一次性消耗
活死双染(Calcein-AM / PI) 荧光显微镜下判读 需要显微镜 + 图像分析,人工量大;PI 需裂解;通量受限

LivingCell-Fluo 的解法:用 Resazurin(刃天青)作为代谢底物。活细胞内的还原酶系把它还原成红色强荧光产物(R-resazurin),荧光强度与活细胞数量成正比。染料可自由进出活细胞且无毒、不影响正常代谢与基因表达,因此:

试剂盒组成(官网技术参数长图)

序号 名称 货号 规格 数量
1 Assay Buffer(类器官活力检测 Buffer) E238001 100 mL 1 瓶
2 Fluorescent Dye(活细胞荧光染料 10×) E238002 1 mg 1 瓶
3 Resazurin Sodium Crystal(刃天青钠晶体) E238003 25 mg 1 瓶

整套试剂盒货号 E238004,规格 10 mL / 50 mL(1000 / 5000 次),储存 4 ℃ 1 年或 -20 ℃ 2 年。

⚠️ 同名货号陷阱:E238003 同时是"Resazurin Sodium Crystal 单组分"和"细胞活性(ATP)检测试剂盒 Organoid Viability ATP Assay Kit"的货号。两者是不同产品线,采购与引用务必写全名。

官网技术参数长图(规格表与试剂盒组成表逐格)

LivingCell-Fluo 试剂盒官网技术参数长图

图 2:官网产品页技术参数长图(1190 × 11781),含 Product Specifications 规格表(Detection method / Detection time / Working solution / Cell culture medium)与 Organoid Viability Assay Kit 组成表(E238001 / E238002 / E238003)。

参数 数值
Detection method Resazurin → Fluorescence
Detection time 24 h
Working solution 1:1000 稀释
Cell culture medium 10 %
推荐板型 96 孔(特点页另列 24 孔适用)
每孔加液量示例 10 µL 工作液
反应条件 37 ℃、5 % CO₂
荧光读数 Ex 约 530 nm、Em 590 nm(说明书口径 Ex 560±10 / Em 590±10)

活力计算公式(官网原文)

Cell viability of organoids (%) = (OD_sample − OD_blank) / (OD_control − OD_blank) × 100%

其中 OD_sample = 实验组信号,OD_control = 未处理对照组信号,OD_blank = 空白孔本底。

实操记录建议写作 RFU / Fluorescence intensity(相对荧光值) 而非 OD —— 本试剂盒读的是荧光而非吸光度,本质是"扣本底 → 相对对照组归一化"。


🔬 二、设备规格与软件功能

2.1 官方四大产品特点(发布稿原文提炼)

  1. 精准测量——细节变化洞察入微
    配备精密传感器,高灵敏度检测,精度 ≤ 0.4%;采用底部读数,排除顶部干扰误差,无需开盖、避免污染。
  2. 高效便捷——科学道路争分夺秒
    即用型,无需裂解细胞,样本放入即读取;96 孔板整板分析时间 < 60 s。
  3. 智能分析——满足多样研究需求
    原始数据以色阶展示;具备活力、毒性测定及连续生长检测分析功能;一键导出分析报告。
  4. 应用延伸——助力高通量药物筛选
    适配 384 孔板;无菌条件下测定后仍可继续培养扩增类器官;预留机械臂接口端,为药物研发一站式自动化平台搭建提供支持。

2.2 操作流程:最快三步读数,全程不到两分钟

LivingCell-Fluo Insight 三步读数流程

图 3:官方产品简介图——最快三步即可读数,全程不到两分钟可得数据,真正做到"即插即用"。

2.3 仪器可调参数(官方软件界面)

LivingCell-Fluo Insight 孔板适配与参数设置

图 4:官方软件参数设置界面(左)+ 96 / 384 孔黑色荧光检测专用板实拍(右)。适配多品牌 96–384 孔培养板,可针对不同场景调节检测速度、检测路线、增益。

参数 可选项
Read Speed(读取速度) 档位可调,默认 Normal
Gain(增益) 档位可调,默认 Middle(官方界面拼写为 Midddle,厂家笔误)
Read route(读取路线) 4 种单选:横向逐行单向 / 横向逐行蛇形 / 纵向逐列单向 / 纵向逐列蛇形

2.4 软件三大模块

LivingCell-Fluo Insight 软件工作流

图 5:官方软件工作流——① 药敏实验模板选择(Drug susceptibility)→ ② 连续监测数据配置导入(Continuous growth monitoring)→ ③ 生长曲线结果可视化与导出。

① 药敏实验模板选择(Drug susceptibility)
4 种预设实验模板,按"封圈 / 无封圈 × 同种 / 异种细胞"分组:

② 连续监测数据配置导入(Continuous growth monitoring)

③ 生长曲线结果可视化


📊 三、官方应用案例(三大案例,含实测数据)

案例 A:结直肠癌类器官活力数据精密度评估

用 E238004 试剂盒联用本机,取得重复检测的变异系数 CV,并用频率偏差分布图对比"实验室某进口品牌酶标仪"。

LivingCell-Fluo Insight 精密度评估

图 6:案例 A 实测图。左:不同细胞数区间下本机与参比进口酶标仪的重复性 CV 对比;中:本机与参比酶标仪的读值偏差频率分布;右:本机对 105%–90% 六档细胞比例的荧光读值响应(可分辨 2% 偏差)。数据来源于客户实验室。

A-1 复现性 CV 对比

检测设备 500–5000 细胞区间 CV 5000–50000 细胞区间 CV
LivingCell-Fluo Insight ≤ 0.39 % ≤ 1.89 %
实验室某进口品牌酶标仪 ≤ 2.62 % ≤ 5.74 %

→ 低细胞量区间精密度约为参比酶标仪的 1/7,高细胞量区间约为 1/3。

A-2 读值偏差频率分布
本机:样本高度集中于 90–109 区间,峰值落在 100 基准(分箱中心 100 处约 72 个样本,100.5 处约 18 个,99 处约 8 个)。
参比酶标仪:分布自 91 延伸至 109,峰值落在 103(偏离基准),离散度明显更大。

A-3 灵敏度(细胞数量偏差分辨力)
以标准接种量为 100 % 基准,配制 105 % / 102 % / 100 % / 98 % / 95 % / 90 % 六档细胞数:

细胞数相对比例 105 % 102 % 100 % 98 % 95 % 90 %
总荧光强度读值 ≈0.80 ≈0.78 ≈0.78 ≈0.76 ≈0.765 ≈0.73

→ 可分辨 2 % 级别的活细胞数量差异,重复误差棒极短,线性响应准确。


案例 B:药物 5-氟尿嘧啶(5-FU)筛选

技术路线是伯桢设备矩阵的一次完整串联:
Organoid Bioprinter(3D 打印接种)→ Star-Map F1(三维成像观察)→ LivingCell-Fluo Insight(活力检测 + IC50 拟合)。

LivingCell-Fluo Insight 5-FU 药敏与 IC50

图 7:案例 B 实测图。A:药物处理后的胰腺导管癌(上)与结直肠癌(下)明场形态,浓度由低到高;B:胰腺导管癌剂量-反应曲线 IC50 = 1.190 µM;C:结直肠癌剂量-反应曲线 IC50 = 0.8526 µM。横轴 Log(Concentration(µM)),纵轴 Cell Viability by Control(%)。

在该体外实验条件下,结直肠癌 IC50 约为胰腺导管癌的 0.72 倍(达到相同 50 % 存活率所需浓度约为 1.40 倍)。

官方图注未给出重复次数、误差棒定义与拟合优度,该差异不宜直接外推为临床结论。


案例 C:人胆管类器官生长监测(连续生长曲线)

LivingCell-Fluo Insight 人胆管类器官连续生长监测

图 8:案例 C 实测图。A:人胆管类器官明场时序观察(D0 / D2 / D4 / D6 / D8 / D12);B:总荧光强度随时间变化(D0 ≈0.19 → D10 ≈1.23,后段上升加速);C:相对生长速率(D2 129.62% → D4 137.44% → D6 156.64% → D8 158.63% 峰值 → D10 146.81%)。

时间点 D2 D4 D6 D8 D10
生长速率(Cell growth rate by previous) 129.62 % 137.44 % 156.64 % 158.63 %(峰值) 146.81 %

→ 监测窗口内始终保持净增殖;D4–D6 增速幅度最大,D8 达峰后回落但仍高于 146 %。

试剂盒说明书给出的常规预期:正常生长状态类器官每 2 天总荧光值应增加 20 % 以上。


⚠️ 四、影响类器官荧光读数的关键变量(官方明确列出的干扰因素)

比较不同组别时,下列条件必须严格一致,否则数据不可比:

  1. 类器官大小 —— 体积越大,背景 / 代谢信号越强;
  2. 类器官形态 —— 囊状 vs 实心影响试剂扩散与代谢响应;
  3. 细胞密度 —— 密度越高信号越强;
  4. Resazurin 浓度 —— 影响荧光强度与检测线性范围;
  5. 孵育时间 —— 时间越长累积信号越强。

→ 官方强调:不同类器官的代谢速率与扩散情况不同,必须先做预实验优化接种量、培养时间、换液节奏。


🧪 五、操作 SOP(试剂盒说明书口径,可直接落地)

96 孔板连续活力检测流程:

  1. 配液:取组份 B(类器官活力检测 Buffer)将组份 A(活细胞荧光染料 10×)按 1:1000 稀释为 1× 工作液。以 96 孔整板为例,每孔 100 µL,共需 9.6 mL;配 10 mL 时用 9 mL Buffer + 1 mL 染料,混合后 120 min 内用完。
  2. 弃液:从培养箱取出待测板,尽量弃净原完全培养液(避免稀释染料 / 避免培养代谢物残留干扰 / 避免培养基组分干扰染料)。
  3. 加染液:沿侧壁每孔缓慢加入 100 µL 1× 工作液;设无类器官的染料阴性对照孔;37 ℃、5 % CO₂ 孵育 30–120 min。
    • 工作液由蓝变粉红说明反应发生;细胞量少时肉眼可能仍呈蓝色,不影响荧光读数。
  4. 读数:荧光酶标仪或 LivingCell-Fluo Insight 读取总荧光强度(Ex 560±10 nm / Em 590±10 nm)。
  5. 回收样本:弃去检测液,重新加入新鲜完全培养基,继续培养 2 天。
  6. 重复 1–4:正常生长的类器官每 2 天总荧光值应增加 20 % 以上。
  7. 计算:按 (样本 − 阴性对照) / (对照 − 阴性对照) × 100 % 换算相对活力。

药敏实验(96 孔):类器官接种 → 加不同浓度药物 → 孵育 → 同样加染液 → 读数 → 软件一键拟合剂量-反应曲线输出 IC50。


🏗️ 六、伯桢设备矩阵(配套选型参考)

环节 设备 作用
样本制备 SmartOrgan™ Dissociator(智能组织解离系统) 自动化组织 → 单细胞 / 类器官解离,替代手工消化
复苏 BioThaw / BioThaw DUAL(细胞无水复苏仪) 无 DMSO / 无水复苏,解决传统复苏 DMSO 毒性
建模 Organoid Bioprinter(类器官高通量生物打印系统) 高通量 3D 打印类器官阵列,标准化 + 均一化
筛选 Optimus Prime(类器官自动化培养 + 高通量药物筛选系统) 培养与筛选一体化,标准化智能实验流程
检测 LivingCell-Fluo Insight(本页主角) 活体代谢荧光活力,精度 ≤0.4 %
成像 Star-Map F1(类器官星图定位成像系统) 相差 / 明场 / 多色荧光 + X-Y-Z 定点追踪 + 全孔多焦面扫描
洁净 / 冻存 BGOptiClean 1300 / YDS-175-216-BG 洁净工作台 / 液氮冻存

试剂线:23 种正常组织 + 18 种肿瘤类器官培养试剂盒、全流程试剂(EasyGel 3D ECM、组织消化液 Plus、OrganoQC 抗真菌添加剂等)、生长因子与小分子、IPS 类器官。


⚖️ 七、同类方案对比与选型逻辑

方案 原理 裂解 连续读数 形态学信息 备注
LivingCell-Fluo Insight(伯桢) Resazurin 荧光,底部读板 否 是(同孔连续多天) 无(纯数值) 类器官专用;精度 ≤0.4 %;384 孔;预留机械臂接口
E238003 ATP 检测试剂盒(伯桢) 裂解 + 荧光素酶 是 否 无 同厂耗材线
BioTek Cytation 5(安捷伦) 明场 / 荧光 + 活细胞成像 + 酶标 视模式 是 有 通用平台,类器官为应用之一(非专用)
CellInsight CX5 / CX7(赛默飞) 高内涵成像 + LED / 共聚焦 否(活细胞) 是 有 出版级成像,吞吐高
xCELLigence RTCA eSight(安捷伦) 阻抗 + 光学成像 否 是(连续阻抗) 有 3D 类器官不规则生长监测见厂家资料
Countstar Spica(艾力特) 培养箱内实时活细胞成像 否 是 有 多色荧光 + AI 分析模板
Star-Map F1(伯桢) 类器官专用高灵敏多色荧光 + 相差 / 明场 + X-Y-Z 定点追踪 否 是(定时拍摄) 有 与本机互补(形态 vs 活力)
Nanolive 3D Cell Explorer-fluo 全息断层 + 关联荧光 否 是 有(3D 内部) 国际竞品,非我方代理

一句话选型逻辑:要"类器官的活力数字"且要连续纵向(生长曲线、药敏曲线)→ LivingCell-Fluo;要"类器官长什么样" → Star-Map F1;要两者兼得 → 伯桢组合方案(案例 B 的实际链路:Bioprinter + Star-Map F1 + LivingCell-Fluo)。


📖 八、相关学术文献(方法学支撑)

获取状态说明(2026-10-27 实测):18 篇中 13 篇为 PDF 全文(11–61 页,均通过 %PDF 魔数 + PyMuPDF 页数校验),3 篇为出版商完整 Protocol 全文(JoVE ×2 + IOP,已转 Markdown),1 篇为完整引用层(订阅墙,摘要 + 113 条参考文献 + 7 条被引),1 篇为摘要 + 元数据(订阅墙)。全部 18 篇已上传至知识库 bozhenfluoinsight 并触发解析。逐篇清单与撞坑记录见该知识库《文献下载状态报告_18篇.md》。

以下为与"类器官活力检测 / 药敏筛选 / 连续生长监测 / 3D 培养读板陷阱"最相关的公开文献,可用于客户技术答疑与方法学引用。

  1. Factors to consider when interrogating 3D culture models with plate readers or automated microscopes. In Vitro Cell & Developmental Biology – Animal, 2021. PMID 33564998. DOI 10.1073/pnas.1819583116
    → 3D 模型在酶标仪 / 自动化显微镜上读数时的关键考量,直接支撑本机"底部读数 + 板型 / 增益可调"的设计逻辑。
  2. Comparison of Cell and Organoid-Level Analysis of Patient-Derived 3D Organoids to Evaluate Tumor Cell Viability. SLAS Discovery, 2020. PMID 32349587.
    → 细胞级 vs 类器官级分析口径对比,说明为什么类器官药筛需要整孔总荧光(bulk)读数而非单细胞分割。
  3. Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Cell Analysis. JoVE, 2022. PMID 36622028. DOI 10.3791/64434
    → 宽场活细胞成像做 bulk + 单细胞双口径药筛,是"数值读板 vs 图像读板"的直接对照方案。
  4. Medium-Throughput Drug- and Radiotherapy Screening Assay using Patient-Derived Organoids. JoVE, 2021. PMID 33999032.
    → 中通量药筛与放疗筛标准流程。
  5. Protocol for drug screening of patient-derived tumor organoids using high-content fluorescent imaging. STAR Protocols, 2022. PMID 35620075.
    → 患者来源类器官 + 高内涵荧光成像药筛的标准操作协议。
  6. A human liver organoid screening platform for DILI risk prediction. Journal of Hepatology, 2023. PMID 36738840.
    → 肝脏类器官筛选平台(DILI 药物性肝损伤风险预测)。
  7. Whole-process 3D ECM-encapsulated organoid-based automated high-throughput screening platform accelerates drug discovery for rare diseases. Life Medicine, 2025. PMID 41089667 · PMCID PMC12517169 · DOI 10.1093/lifemedi/lnaf021
    → wp3D-OAHTS 全流程 3D ECM 包裹类器官自动化高通量平台,13 天完成 2802 化合物筛选(>10,000 颗均一类器官穹顶),筛出 5 个 IC50 < 10 nM 的 hit。伯桢 E238004 用于该平台的类器官生长评估与药筛环节。
  8. Development and validation of the Normalized Organoid Growth Rate (NOGR) metric in brightfield imaging. Communications Biology, 2024. PMID 39627437.
    → 归一化类器官生长速率(NOGR)指标,与本机 C 图"Cell growth rate by previous (%)"同属一类指标。
  9. A microwell platform for high-throughput longitudinal phenotyping and selective retrieval of organoids. Cell Systems, 2023. PMID 37734323.
    → 纵向(longitudinal)表型 + 可选择性回收,是"同一样本连续多时点分析"的另一种工程实现。
  10. Label-Free Imaging Analysis of Patient-Derived Cholangiocarcinoma Organoids after Sorafenib Treatment. Cells, 2022. PMID 36429040.
    → 索拉非尼处理后患者来源胆管癌类器官的无标记成像分析 —— 与本案例 C(人胆管类器官)同癌种。
  11. Single-organoid analysis reveals clinically relevant treatment-resistant and invasive subclones in patient-derived tumor organoids. NPJ Precision Oncology, 2023. PMID 38066116.
    → 单类器官分析揭示耐药与侵袭亚克隆 —— 提示"整孔总荧光"读数看不到亚克隆,需要图像端补充。
  12. Cellular extrusion bioprinting improves kidney organoid reproducibility and conformation. Nature Materials, 2021. PMID 33230326.
    → 生物打印提升类器官均一性(打印端一致性,直接决定活力读数的可比性)。
  13. Advanced 3D imaging and organoid bioprinting for biomedical research and therapeutic applications. Advanced Drug Delivery Reviews, 2024. PMID 38447931.
    → 3D 成像 + 类器官生物打印综述,涵盖案例 B 的完整技术链路。
  14. Developing advanced organoids: challenges, progress, and outlook. BioTechniques, 2024. PMID 39878095.
    → 高级类器官技术挑战与展望。订阅墙文献,已入库摘要 + 元数据;全文需机构订阅手动获取。
  15. The application of pancreatic cancer organoids for novel drug discovery. Expert Opinion on Drug Discovery, 2023. 18(4):429-444. PMID 36945198 · DOI 10.1080/17460441.2023.2194627
    → 胰腺癌类器官在新药发现中的应用(PDAC 方法学综述,Melzer MK 等,乌尔姆大学医院)—— 对应案例 B 的胰腺导管癌组。该文综述的"读出方式"一节直接对应 LivingCell-Fluo 的代谢活力法定位。订阅墙文献,已用完整引用层入库:摘要 + 113 条参考文献 + 7 条被引文献(26.5 KB,见知识库 bozhenfluoinsight)。
  16. Application and challenges of tumor organoid technology in precision immunotherapy. Frontiers in Immunology, 2025. PMID 41488666.
    → 肿瘤类器官在精准免疫治疗中的挑战。
  17. Drug compound screening in single and integrated multi-organoid body-on-a-chip systems. Biofabrication, 2020. PMID 32101533.
    → 器官芯片体系中的化合物筛选。
  18. A microfluidic platform for culturing and high-content imaging of adult stem cell-derived organoids. Scientific Reports, 2025. PMID 41249220.
    → 微流控培养 + 高内涵成像的类器官平台,是"培养与检测一体化"的另一路线对比。

📥 九、官方资料下载

文件 说明 下载
类器官活细胞活性分析试剂盒说明书(中文) E238004 完整实验步骤 + 技术参数 LivingCell-Fluo 中文说明书 PDF
LivingCell-Fluo™ Organoid Vitality Assay Kit(英文) 官方英文版说明书 LivingCell-Fluo English Manual PDF
相关产品信息表 官方发布稿附表(E238004 / 10 mL) 相关产品信息表

相关产品信息表:货号 E238004 | 描述 LivingCell-Fluo™ Organoid Vitality Assay Kit — 类器官活细胞荧光活力分析试剂盒 | 规格 10 mL / 瓶


📋 十、采购与商业信息


📚 十二、方法学文献配套资源(可直接下载)

资源 内容 下载
18 篇文献下载状态报告 逐篇获取形式、DOI/出版商链接(全部 API 验证)、5 条踩坑记录(PMC PoW 解法、OpenAlex gold 陷阱、S2 key 失效等) 下载状态报告 Markdown
PMID 36945198 完整引用层 订阅墙替代方案:完整摘要 + 113 条参考文献 + 7 条被引文献(26.5 KB,Europe PMC / Crossref 真实 API 返回) 下载引用层 Markdown

这两份文件同时已上传至知识库 bozhenfluoinsight,可与 13 篇 PDF 全文一起被检索引用。


📄 十一、资料来源与免责声明

本页面基于公开可查的厂家官方发布稿(2024-12-28 伯桢生物官方专栏)、官网产品页与技术参数图、试剂盒说明书(中/英文)及公开学术文献整理,仅用于产品技术理解与方法学参考。

文中所有性能数据均引自厂家官方发布稿或说明书,第三方客户实验室数据的适用性需以具体实验条件为准;文献部分为方法学支撑,不代表厂家观点。Wiki.js 页面中的全部配图均来自厂家官方发布稿原图,未做任何 AI 生成或修改。


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