Celvivo 3D 人肝星状细胞模型：抗纤维化药物反应与进行性细胞外基质重塑的长期读出
Antifibrotic Drug Response in a Long-Term 3D Human Hepatic Stellate Cell Model of Progressive ECM Remodeling
Karoline Lindgård Mikkelsen, Helle Sedighi Frandsen, Adelina Rogowska-Wrzesinska, Krzysztof Wrzesinski
Celvivo ApS（丹麦 Blommenslyst）+ 南丹麦大学（University of Southern Denmark）| 2026 年会议海报 | 未分配 DOI
核心结论：26 天长程 3D 人肝星状细胞球体模型，用 TGF-β 诱导进行性纤维化、尼达尼布（Nintedanib）做干预，把「正在进行的基质合成」与「已经沉积的结构性基质」拆成两个可分别读出的量；TGF-β 处理后的蛋白组与人肝硬化组织高度相似，而尼达尼布只压住前者、压不住后者。
标签: #liver_fibrosis #hepatic_stellate_cell #3D_spheroid #ECM_remodeling #nintedanib #proteomics #Celvivo
📣 摘要
这份工作要回答的是抗纤维化药物研发里一个长期悬空的问题：药物的药效到底该看「新生基质」还是看「已沉积基质」？ 现有 2D 培养和短期 3D 球体撑不到纤维化形成所需的时间尺度——肝星状细胞（HSC）从静息态转为肌成纤维样表型需要持续刺激，ECM 沉积再叠加交联需要数周，而多数体外模型在 14 天内就因核心坏死或去分化失去读出价值。
作者把人肝星状细胞做成 3D 球体，在旋转培养体系里跑满 26 天，流程为：Day 0 成球 → Day 7 起持续给 TGF-β → Day 14 起叠加尼达尼布 → Day 21 中期分析 → Day 26 终点。读出分四层：ECM 新生标志物（PRO-C1、PRO-C3、FBN-C）、胶原基因表达（COL1A1、COL3A1、COL6A1）、ECM 重塑通路蛋白组、以及与人肝硬化组织的蛋白组比对。
核心技术: 旋转低剪切 3D 培养（Celvivo ClinoReactor）| TGF-β 诱导纤维化模型 | Nintedanib 干预 | ECM 新生前肽标志物（PRO-C1/PRO-C3/FBN-C）| qPCR 胶原基因 | 通路级蛋白组 | 人肝硬化组织蛋白组比对
一句话结果：尼达尼布把 TGF-β 抬起来的 ECM 新生标志物与胶原转录压回去了，但已经把结构胶原沉积下来的那部分基本没动——结论是这类药物主要阻断「持续合成」，而不是「逆转已建成的基质」。
🔬 研究背景
为什么肝纤维化的体外模型难做
肝纤维化的病理核心不是肝细胞死亡，而是肝星状细胞的持续活化：静息态 HSC 储存维生素 A，一旦被 TGF-β 等因子持续刺激就转成肌成纤维样细胞，大量分泌 I 型、III 型、VI 型胶原和纤连蛋白，同时上调基质金属蛋白酶的组织抑制物，让基质越堆越硬。这个过程在体内以「月」计，在体外要复现，就同时需要三件事：足够长的培养窗口、足够低的机械剪切（否则 HSC 会因机械应力自行活化或去分化）、以及一个能把「新生」和「存量」分开的读出体系。
2D 培养在这三点上都撑不住。常规 3D 球体在静态孔板里通常只能维持 7–14 天，之后核心缺氧坏死、球体崩解，恰好落在纤维化刚要成型的时间点之后。旋转培养把细胞维持在持续自由落体状态，剪切力压到 mPa 量级，让球体可以做到毫米级并长期保持结构完整——这是本工作能跑满 26 天的物理前提。
核心问题
- 能否让人肝星状细胞在体外维持 26 天而不失去表型与活力，从而覆盖纤维化的形成期与干预期？
- TGF-β 持续刺激在转录与蛋白两个层面上，究竟把哪些 ECM 通路上调了？
- 尼达尼布抑制的是「正在进行的基质合成」，还是也能清除「已经沉积的结构性胶原」？
- 体外诱导出的纤维化表型，与人肝硬化组织的蛋白组特征到底有多相似？
Celvivo 肝纤维化方向已有文献谱系（本次整理）
把 Celvivo 公开出版物与应用笔记里与肝纤维化/肝损伤/肝模型相关的条目做一次归并，可见这个方向的研究是沿「肝细胞毒性 → 肝代谢疾病 → 肝星状细胞纤维化」三条支线推进的，本海报处在最右端的纤维化支线：
| 年份 | 文献 / 材料 | 模型 | 与本海报的关系 | 状态 |
|---|---|---|---|---|
| 2013 | HepG2/C3A 3D 球体在胰酶消化后需 18 天重建关键肝功能 | HepG2/C3A | 长程培养可行性基础 | 已有专项页 |
| 2016 | 对乙酰氨基酚诱导的 S-亚硝基化 / S-亚磺酰化信号 | HepG2/C3A 球体 | 氧化应激与药物性肝损伤 | 待整理 |
| 2018 | 微反应器中 3D 培养的代谢重编程与生理功能恢复 | HepG2/C3A | 旋转培养恢复肝功能的机制解释 | 已有专项页 |
| 2018 | 3D 培养评估肝功能与功能障碍的研究进展 | 综述 | 领域框架 | 已有专项页 |
| 2021 | HepG2/C3A 3D 模型用于化学品遗传毒性检测 | HepG2/C3A | 毒理终点标准化 | 已有专项页 |
| 2022 | 早发型非酒精性脂肪肝的蛋白组与脂质组图谱 | HepG2/C3A 球体 | 同一团队，脂肪变性上游 | 已有专项页 |
| 2022 | 3D 肝球体模型研究可逆组蛋白乙酰化与基因表达调控 | HepG2/C3A 球体 | 同一平台，表观遗传读出 | 已有专项页 |
| 2026 | 本海报：长期 3D 人肝星状细胞模型的抗纤维化药物反应 | 人 HSC 球体 | 本条目 | 本次补空白 |
说明：本海报是该方向目前唯一直接把终点落在「抗纤维化药效判定」上的材料，前面各条都在肝细胞或代谢层面。这也解释了为什么它值得单独成页——Celvivo 线在纤维化这一端此前没有一手数据。
🧪 实验方法
培养平台
人肝星状细胞在旋转低剪切体系内成球并长期培养。设备侧的关键参数为：单个一次性反应器工作体积 10 mL，单台设备同时容纳 6 个反应器，转速可在 1.5–100 RPM 区间双向调节，配备实时成像。低剪切是这套体系能支撑 26 天的核心——静态培养中 HSC 会因贴壁应力与营养梯度自行活化或坏死，而持续旋转让球体在近似自由落体状态下接受均匀的营养与气体交换。
同一团队此前用这套旋转单元做过 HepG2/C3A 肝球体的长程培养与脂肪变性建模（球体培养 21 天后加 65 µM 油酸 + 45 µM 棕榈酸，TGF-β1 用 2 ng/mL 从第 8 天起持续 14 天），本海报把细胞从肝细胞系换成原代人肝星状细胞、把刺激从脂肪酸换成 TGF-β，是同一方法学骨架向纤维化方向的延伸。
实验时间轴
| 时间点 | 操作 | 目的 |
|---|---|---|
| Day 0 | 接种成球 | 建立均一 3D 球体 |
| Day 2 | 首次形态记录 | 确认成球质量与均一性 |
| Day 7 | 开始持续 TGF-β 刺激 | 启动 HSC 活化与基质沉积 |
| Day 14 | 在 TGF-β 背景上叠加尼达尼布 | 建立干预组 |
| Day 21 | 中期纵向分析 | 捕捉纤维化成型期 |
| Day 26 | 终点分析 | 判定药效是否持续 |
三个平行组：Control（不加 TGF-β、不加药）、TGF-β（只诱导）、Nintedanib（诱导 + 干预）。
读出层次
| 层次 | 具体指标 | 说明 |
|---|---|---|
| ECM 新生前肽 | PRO-C1、PRO-C3、FBN-C | 反映「正在合成」的胶原与纤连蛋白，是 turnover 的即时指标 |
| 胶原基因转录 | COL1A1、COL3A1、COL6A1（qPCR，2^-ΔΔCt） | 反映合成指令层面的变化 |
| ECM 重塑通路蛋白组 | 基质金属蛋白酶活化、纤连蛋白基质形成、整合素-ECM 相互作用、胶原生物合成与纤维组装、ECM 降解等通路 | 反映通路级别的系统性响应 |
| 结构蛋白丰度与形态 | 胶原蛋白 Log2 丰度 + DAPI/Collagen 荧光染色 | 反映「已经沉积下来」的存量 |
| 与人体组织比对 | 与人肝硬化组织蛋白组做同向比对 | 反映模型的临床相关性 |
统计分析
海报以星号标注组间显著性（常规对应 *p<0.05、**p<0.01、***p<0.001），并提供误差棒。需要明确说明：海报作为会议展示材料，未在图上标注具体数值标签、样本量与检验方法，因此下文所有结论以「变化方向 + 显著性等级 + 轴范围」表述，不引用未经海报印出的具体数字。
📊 核心结果与配图
图注：本图为海报的 Workflow 板块，单幅流程图（1 个主时间轴 + 4 个读出模块图标）。时间轴标注 6 个节点：Day 0 球体形成、Day 2 首次形态记录、Day 7 开始 TGF-β 刺激、Day 14 开始尼达尼布处理、Day 21 纵向分析、Day 26 终点。流程图右侧并排列出四条读出线：ECM 生物标志物（PRO-C1、PRO-C3、FBN-C）、基因表达（qPCR）、蛋白组学、功能测定与免疫染色。图中出现培养设备实物照片，但未印刷具体型号文字。论文核心 claim：纤维化的诱导期（Day 7–14）与干预期（Day 14–26）被刻意错开，使「已形成的基质」与「正在形成的基质」在时间上可分。
1. 26 天连续培养下球体形态与活力保持稳定
TGF-β 与尼达尼布都是会改变细胞状态的强干预，如果球体本身在 26 天里先崩了，后面所有组间差异都无法解释。作者因此把「模型稳定性」当作第一个要证的前提，而不是理所当然的背景条件。
图注：本图为海报板块 1「Dynamic HSC spheroids remain stable during prolonged TGF-β and Nintedanib exposure」，含 3 类图：① 显微图矩阵（3 行 × 5 列），行标签为 Control、TGF-β、Nintedanib，列标签为 Day 2、Start TGF-β Day 7、Start Nintedanib Day 14、Day 21、Day 26；② 面积折线图，横轴 Day 2/7/14/21/26，纵轴 Area (mm²)，范围 0.5–1.5，三条曲线对应三组；③ Viability 与 Protein 两组柱状图。论文核心 claim：旋转培养在 26 天内维持了球体结构完整与活力，使「长期 TGF-β 与尼达尼布暴露下的纤维化研究」在方法上成立。
| 维度 | 说明 |
|---|---|
| 做了什么 | 3 组球体（Control / TGF-β / Nintedanib）在 Day 2、7、14、21、26 五个时间点做显微成像；同步测球体投影面积（mm²）、活力与总蛋白 |
| 发现什么 | 显微图矩阵显示 26 天内三组球体均保持完整球形轮廓、无崩解；面积曲线在 Day 2 至 Day 26 区间维持在同一量级（纵轴 0.5–1.5 mm²），未出现静态培养典型的后期缩小；活力与总蛋白柱状图在三组间未出现随时间的系统性塌陷 |
| 说明什么 | 这一条是整篇的方法学前提：它把「组间差异」与「模型退化」这两个混淆因素拆开了。只有在球体本身不掉活力的前提下，Day 21/26 的 ECM 指标差异才能归因于药物，而不是归因于培养时间过长导致的坏死 |
2. TGF-β 抬高 ECM 新生标志物，尼达尼布把它们压回去
这是全篇最核心的一组数据：三个 ECM 新生前肽 + 三个胶原基因，构成「蛋白层」与「转录层」的双重读出。
图注：本图为海报板块 2「Nintedanib suppresses active fibrogenesis」，含 6 个分组柱状图，分上下两排：上排为蛋白层 PRO-C1、PRO-C3、FBN-C（纵轴 Propeptides，ng/mL），下排为转录层 COL1A1、COL3A1、COL6A1（纵轴 Fold change，2^-ΔΔCt）。每组三根柱依次为 Control（浅紫）、TGF-β（亮蓝）、Nintedanib（粉），带误差棒，横轴为 Age (Days)，比较 21 天与 26 天两个时间点。论文核心 claim：持续 TGF-β 刺激同时抬高 ECM 生物标志物与胶原基因表达，尼达尼布对两者均有下调，说明它抑制的是持续中的 ECM 生产。
| 维度 | 说明 |
|---|---|
| 做了什么 | 在 Day 21（诱导 14 天、干预 7 天）与 Day 26（诱导 19 天、干预 12 天）两个时间点，用前肽特异性抗体测 PRO-C1（I 型胶原形成）、PRO-C3（III 型胶原形成）、FBN-C（纤连蛋白形成），并用 qPCR 测 COL1A1、COL3A1、COL6A1 相对表达 |
| 发现什么 | 变化幅度最大的是 FBN-C：TGF-β 组在 Day 19/21/26 三个时间点均显著高于 Control（Day 19 与 Day 21 为 *** 与 ** 双标注，Day 26 为 ），尼达尼布组基本回到接近 Control 的水平（趋势上约为 TGF-β 组的三分之一量级）。PRO-C3 在 Day 21 出现 Control vs TGF-β（**）与 TGF-β vs Nintedanib（）双标注，Day 26 均值差异仍在但误差棒大、未标星号。PRO-C1 变化幅度最小（纵轴 0–500 ng/mL 区间内三组贴近），Day 21 有 *** 标注。转录层 COL1A1 在 Day 21 为 **、Day 26 为 *；COL6A1 在 Day 21 为 *、Day 26 出现 ** 与 *** 双标注；COL3A1 全图无任何显著性标注，Day 21 尼达尼布组均值甚至略高于 TGF-β 组 |
| 说明什么 | 三个前肽里只有 FBN-C 呈现「强诱导 + 强回落」的干净模式，说明纤连蛋白基质形成是这个模型里最灵敏的纤维化活性指标；PRO-C1 基线高、动态范围小，作为药效读出偏钝。COL3A1 无显著性是这组数据里最值得注意的反面证据——它说明「尼达尼布全面抑制胶原合成」这个说法不成立，III 型胶原这条线在这个剂量与时间窗下没被推动。做客户方案时若只测 COL3A1 会得出「药物无效」的假阴性结论 |
3. 已经沉积的结构性胶原，尼达尼布基本没动
第 2 组结果容易被读成「药有效，纤维化逆转了」。第 3 组数据正是用来纠正这个读法的：它测的不是「正在合成多少」，而是「已经堆在那里多少」。
图注：本图为海报板块 3「Structural collagen proteins persist following Nintedanib treatment」，含 3 个 Log2 丰度柱状图（COL1A1、COL3A1、COL6A1，纵轴 Log2 abundance，量程在 20–35 区间，三组柱对应 Control / TGF-β / Nintedanib，比较 Day 21 与 Day 26）与 3 幅荧光显微图（行标签 Control / TGF-β / Nintedanib，通道标注 DAPI 与 Collagen）。图中 COL1A1 与 COL6A1 可见显著性星号，COL3A1 组间差异最小。论文核心 claim：尽管 ECM 生产被抑制，结构性胶原蛋白与胶原染色在尼达尼布处理后仅小幅变化，提示它抑制的是正在进行的基质生产，而不是逆转已建成的 ECM。
| 维度 | 说明 |
|---|---|
| 做了什么 | 对同一批球体做蛋白组定量，读 COL1A1、COL3A1、COL6A1 的 Log2 丰度；同时做石蜡切片、DAPI 与 Collagen 双通道荧光染色，比较三组的胶原沉积形态 |
| 发现什么 | 三个结构胶原的 Log2 丰度在三组之间差异远小于第 2 组的前肽变化，量程内基本平行；荧光图显示 TGF-β 组胶原信号增强、尼达尼布组仅部分回落，未回到 Control 水平 |
| 说明什么 | 这一条把「合成速率」与「存量」明确区分为两个不同的药效维度。它的临床对应很清楚：已形成的纤维化在短期给药后不会消失——这与临床上抗纤维化药物需要长期给药、且影像学改善滞后于生物标志物改善的观察一致。对做客户方案的人来说，这条决定了读出指标的选取：判断药有没有活性看前肽，判断纤维化是否逆转必须看组织学与总量 |
4. 通路层面：尼达尼布下调的是「重塑」而不只是「合成」
单看某个胶原基因会漏掉基质降解与交联这一半。作者用通路级蛋白组把「合成端」和「降解端」一起看了。
图注：本图为海报板块 4「Nintedanib attenuates ECM remodeling pathways」，主体是一张通路级热图，标题为 Extracellular matrix remodeling pathways。可读的通路行包括：基质金属蛋白酶活化（Activation of matrix metalloproteinases）、纤连蛋白基质形成（Fibronectin matrix formation）、非整合素膜-ECM 相互作用、ECM 蛋白聚糖、整合素细胞表面相互作用、细胞外基质组织（Extracellular matrix organization）、胶原生物合成与修饰酶、细胞外基质降解、胶原降解、胶原形成。列标签为成对比较设计：N21vC21、N26vC26、T21vC21、T26vC26、N21vT21、N26vT26（N=尼达尼布、T=TGF-β、C=Control，数字为天数），色标范围 −4 至 4，格内有显著性星号。论文核心 claim：TGF-β 上调了与胶原形成和基质组织相关的 ECM 重塑通路，尼达尼布降低了这些响应，与抑制活跃纤维发生一致。
| 维度 | 说明 |
|---|---|
| 做了什么 | 对三组球体做蛋白组定量后，按 ECM 重塑相关通路归集蛋白，计算各成对比较（尼达尼布 vs Control、TGF-β vs Control、尼达尼布 vs TGF-β，各分 Day 21 与 Day 26）的通路水平差异，做热图聚类 |
| 发现什么 | 在成对比较列里，T21vC21 与 T26vC26 两列在胶原形成、细胞外基质组织、胶原生物合成与修饰酶等行呈现同向上调；N21vT21 与 N26vT26 两列在同一批行呈现反向下调，且 Day 26 的下调幅度大于 Day 21；胶原降解与 ECM 降解两条通路的方向与合成端相反，说明尼达尼布同时改变了 turnover 的两个方向，而不只是压住合成 |
| 说明什么 | 通路层面的价值在于排除了「单一指标偶然波动」的解释：十个 ECM 相关通路里有多个同向变化，构成一个内部一致的模式。更重要的是它显示尼达尼布的作用面覆盖降解端——这对判断药物机制很关键：如果只抑制合成而不影响降解，基质总量会缓慢下降；如果同时改变降解，则可能出现「合成被压但降解也被压」的净效应相互抵消，这也解释了第 3 组里结构胶原为什么没有明显减少 |
5. 与人肝硬化组织的蛋白组比对：模型相关性成立，但纤维化特征并未完全消退
模型能不能用，最终看它像不像人的病。这一组把体外球体直接放到人肝硬化组织的蛋白组坐标里比对。
图注：本图为海报板块 5「Proteomic comparison with human liver fibrosis」，主体是一张蛋白组比对热图，行分组包含 Control、Liver（人肝组织）、TGF-β、Nintedanib 四类样本，底部按功能分为 Signaling（信号）、Collagen（胶原）、Adhesion and ECM proteins（黏附与 ECM 蛋白）、ECM remodeling（ECM 重塑）四个板块。热图右侧蛋白名可读到 COL1A1、COL1A2、COL4A1、COL4A2、COL6A3、FN1、EMILIN1、FBN1、THBS1、SPARC、VCAN、BGN、LUM、MMP2、MMP14、SERPINH1、TIMP1 等。论文核心 claim：TGF-β 处理的球体与肝硬化肝组织相似，而尽管尼达尼布降低了纤维化相关蛋白，纤维化特征仍持续存在。
| 维度 | 说明 |
|---|---|
| 做了什么 | 将体外三组球体的蛋白组数据与人肝硬化组织样本的蛋白组数据放在同一坐标系下比对，按信号、胶原、黏附与 ECM、ECM 重塑四个功能板块分组呈现 |
| 发现什么 | TGF-β 组在 Collagen 与 Adhesion and ECM proteins 两个板块的表达模式与 Liver（人肝组织）样本同向；尼达尼布组在这两个板块向 Control 方向回落，但仍有部分蛋白停留在 TGF-β 一侧，形成残留的纤维化特征；ECM remodeling 板块里 MMP2、MMP14、TIMP1、SERPINH1 等重塑相关蛋白在三组间区分明显 |
| 说明什么 | 这是整份材料里对「模型可信度」最直接的证据：它不只是证明球体被 TGF-β 刺激了，而是证明刺激后的分子表型落在人肝硬化的坐标附近。同时它给出了一个诚实的边界——单次尼达尼布干预不能把蛋白组拉回正常，残留特征的存在本身说明「纤维化逆转需要更长给药窗口或联合方案」，这对设计后续实验比「药有效」这个结论更有用 |
💡 与可应用的产品/平台的关联
本材料来自 Celvivo 自有实验室，方法学直接建立在旋转低剪切 3D 培养平台上，产品关联不是推测而是论文方法本身。
| 产品/平台 | 关联维度 | 关联度 | 说明 |
|---|---|---|---|
| Celvivo ClinoStar + ClinoReactor | 方法直接使用 + 长程培养刚需 | ⭐⭐⭐⭐⭐ | 本研究 26 天连续培养的物理前提。10 mL 一次性反应器、1.5–100 RPM 双向调节、低剪切悬浮，是本模型能覆盖纤维化形成期与干预期而不出现核心坏死的原因 |
| 肝星状细胞 3D 球体模型（HSC spheroid） | 疾病模型直接对应 | ⭐⭐⭐⭐⭐ | 直接对应肝纤维化药效评价场景：TGF-β 诱导 + 抗纤维化药干预 + ECM 新生/存量双读出 |
| ECM 新生前肽读出组合（PRO-C1 / PRO-C3 / FBN-C） | 读出方法可迁移 | ⭐⭐⭐⭐ | 三个前肽提供 turnover 即时读数，可作为抗纤维化药物筛选的早期活性指标；本数据显示 FBN-C 动态范围最大 |
| 共培养构型（LX-2 + 肝细胞 9:1） | 方法可衔接 | ⭐⭐⭐⭐ | Celvivo 官方共培养方案用肝星状细胞与 HepG2/C3A 按 9:1 共培养、14–21 天读 α-SMA 与 collagen I；与本海报的单细胞型 HSC 球体构成「纯 HSC 模型」与「HSC-肝细胞共培养模型」两条互补路线 |
| 通路级蛋白组读出 | 数据深度可迁移 | ⭐⭐⭐⭐ | 十个 ECM 重塑通路的成对比较设计，可直接复用于客户项目的机制解释与生物标志物筛选 |
面向客户（按场景）
- 抗纤维化药物研发客户：需要区分「抑制新生基质」与「逆转已沉积基质」时，本模型的时间轴设计（诱导期与干预期错开）与双读出体系（前肽 vs 结构胶原）可直接复用；建议把 FBN-C 作为主要活性指标、COL3A1 单独看会漏。
- 肝病 CRO / 药企转化医学：需要把体外结果与人组织挂钩时，本材料的「体外球体 vs 人肝硬化组织蛋白组同坐标比对」是一条现成路径，可显著提升数据在项目申报与对外发表中的说服力。
- 学术 PI（肝纤维化机制方向）：需要长程培养而不失去 HSC 表型的体系时，26 天连续培养 + 低剪切是核心参数；共培养构型（9:1）可作为从纯 HSC 走向微环境模拟的下一步。
- 工业客户做方法学转移：本材料给出了完整的读出层次（前肽 → 转录 → 通路蛋白组 → 组织学/总量），可作为客户实验室建立 SOP 时的分层验收清单。
🏷️ 结论
- 26 天长程 3D 人肝星状细胞球体模型成立：三组球体在 Day 2 至 Day 26 期间保持形态完整与活力，使纤维化的形成期与干预期都能在同一个培养体系内覆盖。
- 尼达尼布抑制的是「持续中的基质合成」，不是「已建成的基质」：ECM 新生前肽与胶原转录被下调，而结构胶原的 Log2 丰度与胶原染色仅小幅变化——这是本工作最核心、也最容易被误读的一条。
- 读出指标的灵敏度差异很大：FBN-C 呈现最干净的「强诱导 + 强回落」，PRO-C1 动态范围偏小，COL3A1 在整个时间窗内无显著变化；只用单一胶原基因判断药效会产生假阴性。
- 通路层面覆盖合成与降解两端：十个 ECM 重塑通路在 TGF-β 与尼达尼布之间呈同向可解释的变化模式，说明药物作用面不只限于转录层。
- 模型相关性有直接证据、也有明确边界：TGF-β 处理后的球体蛋白组与人肝硬化组织同向；但尼达尼布单药干预后纤维化特征仍残留，提示逆转需要更长窗口或联合方案。
📖 文献信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 标题 | Antifibrotic Drug Response in a Long-Term 3D Human Hepatic Stellate Cell Model of Progressive ECM Remodeling |
| 作者 | Karoline Lindgård Mikkelsen、Helle Sedighi Frandsen、Adelina Rogowska-Wrzesinska、Krzysztof Wrzesinski |
| 单位 | Celvivo ApS（丹麦 Blommenslyst）、南丹麦大学（University of Southern Denmark） |
| 类型 | 会议海报（Conference Poster），2026 年 |
| DOI / PMID | 未分配（会议展示材料） |
| 资助 | Innovation Fund Denmark（Industrial PhD fellowship）、Novo Nordisk Foundation、Danish Agency for Higher Education and Science（PLATO, S22-00012B） |
| 合作方 | Nordic Bioscience（生物标志物检测）、南丹麦大学（蛋白组分析） |
| PDF 来源 | 官方出版物库内置文档 Antifibrotic_HSC_Celvivo_poster.pdf（1.6 MB，单页高分辨率海报） |
参考文献
- Frandsen HS, Vej-Nielsen JM, Smith LE, Sun L, Mikkelsen KL, Thulesen AP, Hagensen CE, Yang F, Rogowska-Wrzesinska A. Mapping Proteome and Lipidome Changes in Early-Onset Non-Alcoholic Fatty Liver Disease Using Hepatic 3D Spheroids. Cells. 2022;11(20):3216. DOI: 10.3390/cells11203216
- Stransky S, Cutler R, Aguilan J, Nieves E, Sidoli S. Investigation of reversible histone acetylation and dynamics in gene expression regulation using 3D liver spheroid model. Epigenetics & Chromatin. 2022;15:35. DOI: 10.1186/s13072-022-00470-7
- Wrzesinski K, Fey SJ. Metabolic Reprogramming and the Recovery of Physiological Functionality in 3D Cultures in Micro-Bioreactors. Bioengineering. 2018;5(1):22. DOI: 10.3390/bioengineering5010022
- Calitz C, Hamman JH, Fey SJ, Wrzesinski K, Gouws C. Recent advances in three-dimensional cell culturing to assess liver function and dysfunction: from a drug biotransformation and toxicity perspective. Toxicology Mechanisms and Methods. 2018. DOI: 10.1080/15376516.2017.1422580
- Štampar M, Sedighi Frandsen H, Rogowska-Wrzesinska A, Wrzesinski K, Filipič M, Žegura B. Hepatocellular carcinoma (HepG2/C3A) cell-based 3D model for genotoxicity testing of chemicals. Science of the Total Environment. 2021;755:143255. DOI: 10.1016/j.scitotenv.2020.143255
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|---|---|
| 本海报：Antifibrotic Drug Response in a Long-Term 3D Human Hepatic Stellate Cell Model of Progressive ECM Remodeling | 下载 |
| 同团队方法学前作：Mapping Proteome and Lipidome Changes in Early-Onset NAFLD Using Hepatic 3D Spheroids（Cells 2022） | 下载 |
- 联系人：李东伟
- 📞 18045130660
- 🌐 https://www.biokingdom.top
转发语: Celvivo 官方实验室把肝星状细胞球体养到 26 天，用 TGF-β 诱导纤维化、尼达尼布做干预，第一次把「正在合成的基质」和「已经堆好的基质」拆成两个可分别读出的量——结论是这类药主要阻断持续合成、并不能逆转已建成的纤维化，而且和人的肝硬化组织蛋白组能对上。做抗纤维化药效评价的人，这份读出体系值得直接照着搭。🧠⚡